เมื่อหัวใจมีรูปร่างเป็นโครงร่างที่เหมาะสม การเปลี่ยนแปลงเชิงพัฒนาการเพิ่มเติมจึงเกิดขึ้น หัวใจเริ่มต้นเป็นห้องเดียว แต่ด้วยการเจริญเติบโตของผนังกั้นห้องต่างๆ ทำให้เกิดห้องสี่ห้องที่แยกจากกัน ผนังกั้นหัวใจห้องล่างของกล้ามเนื้อมีต้นกำเนิดจากด้านล่างของหัวใจห้องล่าง กล้ามเนื้อหัวใจ โดยมีผนังกั้นเป็นพังผืดก่อตัวขึ้นหลังจากนั้นไม่นาน เชื่อมต่อกับผนังกั้นเอออร์ตา-ปอดเมื่อบิดตัวลงและหลอมรวมกัน ในเวลานี้หมอนอิง endocardial ยังปรากฏขึ้นและแยก atria และ ventricles ซ้ายและขวา การเปลี่ยนแปลงโครงสร้างหรือข้อบกพร่องในกระบวนการเหล่านี้สามารถนำไปสู่ความผิดปกติของหัวใจพิการแต่กำเนิดได้